美國TREVIGEN公司成立於1992年，致力於研發偵測細胞凋零、DNA的斷損與修復，以及基因多樣性分析所需用到的抗體與試劑。 業務專員 許 虹宜 0920312382
細胞凋亡、損傷研究的利器
--Comet Assay(彗星試驗)及FLARE檢測試劑盒
Comet Assay Single Cell Gel Electrophoresis
(彗星試驗/單細胞凝膠電泳，SCGE)
單細胞凝膠電泳(Single-Cell Gel Electrophoresis, SCGE)又稱彗星試驗(Comet Assay)為一項較新的電泳技術，自成功地用於檢測DNA單鏈斷裂以來，經不斷地改進，已成為一種快速、靈敏和簡便地檢測DNA損傷地方法，廣泛地應用於DNA放射損傷、DNA剪切損傷、DNA交聯的檢測、藥物的遺傳毒性評價和細胞凋亡鑒定等工作中。
原理：各種因素誘發細胞DNA損傷後會影響DNA的高級結構，使其超螺旋鬆散。這種細胞經過實驗中細胞原位裂解(堿裂解)、DNA解鏈等過程後，電泳時損傷的DNA從核中溢出，朝陽極方向泳動，產生一個尾狀帶，未損傷的DNA部分則保持球形，二者共同形成 "彗星"。在一定範圍內，"彗星"的長度(代表DNA遷移距離)和經螢光染色或銀染色後，"彗星"螢光強度或光密度(代表DNA的量)與DNA損傷程度相關，因此可以定量檢測單個細胞中的DNA損傷。
TREVIGEN公司提供以下三種CometAssay檢測試劑盒
產品種類 | CometAssay Kit (螢光染色) | CometAssay Silver Staining Kit(銀染) | CometSlide™ HT (高通量) |
|
染料 | SYBR® Green I核酸染料 | 銀 | SYBR® Green I核酸染料 | |
檢測方式 | 螢光顯微鏡 | 光學顯微鏡 | 螢光顯微鏡 | |
樣品處理數/玻片 | 2個 | 2個 | 20個 | |
優點 |
| 永久保存染色標本(而SYBR® Green I螢光染料易淬滅) | 快速、可靠地分析大量標本 | |
共同特點 | 關鍵技術：獨有的、經特殊處理的CometSlide™玻片，可促使低熔點瓊脂糖粘附在玻片上，避免了傳統方法(需製備基底層瓊脂和預處理)的耗時和不可靠。因此具有以下優點： 1. 快速 2. 方便：將細胞加入低熔點Comet LMAgarose(瓊脂糖)-無需基底層或預處理，並吸移至CometSlide™玻片即可 3. 結果可靠
另外在每個CometSlide™玻片有一個疏水屏障，其有助於將細胞直接鋪在玻片上並可使用Trevigens DNA修復酶中的任何一種 | |||
應用 | 1. 檢測和定量DNA損傷 2. 快速、方便地鑒別凋亡細胞 3. 跟蹤DNA損傷 | |||
相關產品：
目 錄 號 | 產 品 名 | 規 格 |
CometSlide | 2 片 | |
4250-050-03 | CometSlide | 25片 |
4250-200-03 | CometSlide | 100片 |
4250-050-K | CometAssay Kit | 50 Samples |
4254-200-K | CometAssay Silver Staining Kit(銀染試劑) | 200 Samples |
4251-050-K | CometAssay Silver Kit (含4254-200-K銀染試劑) | 50 Samples |
4252-040-01 | CometAssay HT Slide | 2片 |
4252-040-K | CometAssay HT Sample Kit | 40 samples |
4252-200-01 | CometAssay HT Slide | 10 samples |
4252-500-01 | CometAssay HT Slide | 25 samples |
FLARE™ (Fragment Length Analysis using Repair Enzymes)Assay Kits
(使用修復酶的片段長度分析試劑盒)
用途：使用不同的DNA修復酶來檢測單個細胞中的DNA損傷類型
原理：與Comet Assay(彗星試驗)原理相同,不同點在於在檢測前加入DNA修復酶孵育來修復損傷的DNA，以確定DNA損傷類型。
用法：
誘導待檢測細胞損傷
將細胞浸埋在FLARE Slide(玻片)上的低熔點瓊脂糖內
裂解細胞並與DNA修復酶孵育
進行彗星電泳並分析
產品
TREVIGEN公司提供六種FLARE檢測試劑盒，分別含有六種DNA修復酶，即Fpg, Endonuclease III, hoGG1, T4-PDG, cv-PDG和UVDE。
每種FLARE檢測試劑盒分為完全試劑盒(FLARE Kit)和模組試劑盒(FLARE Module)兩種
FLARE Kit：包括所有檢測試劑及玻片，如修復酶、試劑、FLARE玻片及低熔點瓊脂糖等
FLARE Module：僅提供酶和緩衝液，無FLARE玻片和低熔點瓊脂糖等，因此需與TREVIGEN公司的Comet Assay Kit配合使用。
目錄號 | 產品名 | 所含DNA修復酶 | 所識別的損傷 |
4040-100-FK
| E. coli Fpg. FLARE Kit | Fpg(Formamidopyrimidine-DNAGlycosylase, 甲醯氨基嘧啶-DNA糖基化酶) | 8-oxoguanine, DNA containing formamidopyrimidine moieties |
4040-100-FM
| E. coli Fpg FLARE Module | ||
4045-100-FK | E. coli Endonuclease III FLAREKit | Endonuclease III(核酸內切酶III) | Thymine glycol, 5,6-dihydrothymine,urea, 5-hydroxy-6-hydrothymine,5,6-dihydrouracil, alloxan,5-hydroxy-5-hydrouracil,uracil glycol,5-hydroxycylosine,5-hydroxyuracil, thymine ring saturated or fragmentation product |
4045-100-FM | E. coli Endonuclease III FLARE Module | ||
4130-100-FK | hoGG1 FLARE Kit | hoGG1(Human 8-oxo-Guanine DNA Glycosylase, 人 8-氧鳥嘌呤DNA糖基化酶) | 8-oxoguanine, DNA containing formamidopyrimidine moieties |
4130-100-FM | hoGG1 FLARE Module | ||
4055-100-FK | T4-PDG FLARE Kit | T4-PDG(T4 phage pyrimidine dimer glycosylase，T4噬菌體嘧啶二聚體糖基化酶) | Cis-syn isomers of cyclobutone pyrimidine dimers |
4055-100-FM | T4-PDG FLARE Module | ||
4065-100-FK | cv-PDG FLARE Kit | cv-PDG(chorella virus pyrimidine dimer glycosylase, chorella病毒嘧啶二聚體糖基化酶) | Cis-syn and trans-syn isomers of cyclobutone pyrimidine dimers |
4065-100-FM | cv-PDG FLARE Module | ||
4100-100-FK | S. pombe UVDE FLARE Kit | UVDE(Ultraviolet DNA Endonuclease,紫外線DNA核酸內切酶) | cyclobutone pyrimidine dimers,(6-4) photoproducts |
4100-100-FM | S. pombe UVDE FLARE Module |
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