T-Pro LumiFast Chemiluminescence Detection Kit & T-Pro LumiFast Plus Chemiluminescence Detection Kit 為一方便用於偵測直接或間接帶有HRP的Western blotting,Southern 或 Northern化學發光之試劑套組。在有過氧化氫存在的情形下,Horseradish peroxidase (HRP)會催化環狀二?基??(cyclic diacylhydrazides)的氧化,像是發光胺(luminol)。氧化當下,發光胺(luminol)的中間產物處於激發態,此產物藉由發光的方式衰退為基態。強化劑可增強發光的能量。利用此方法可以藉由直接或間接標定有HRP的抗體/鏈親和素(streptavidin)進而偵測特殊抗原或是核酸序列。
操作流程:
1.將T-Pro LumiFast Chemiluminescence Detection Kit & T-Pro LumiFast Plus Chemiluminescence Detection Kit 中的試劑A及試劑B等體積混合至足夠蓋過membrane的使用量(平均用量最少為0.1ml/cm2)。於室溫使此混合試劑均勻混合作用1-2分鐘。
2.將membrane上過量的緩衝液倒掉,但要保持轉漬膜的濕潤。加入步驟1混合好的試劑於轉漬膜上,在室溫下作用1-2分鐘。
3.將步驟2過多的混合試劑倒掉,且將轉漬膜置於兩層保鮮膜中間或用兩片透明塑膠片密封,注意不可以有氣泡,並將轉漬膜吸附蛋白正面朝上,同時轉漬膜請勿過濕。
4.將步驟3轉漬膜置入底片夾中。置入底片,要避光或是使用紅光。曝光約30至90秒。
5.置入新的底片前,請先將原先片夾中的底片取出,並將底片放入顯影劑中。
6.第二張底片的曝光時間可依據第一張的時間做調整。
7.如果訊號過強,可在加入呈色劑15~30分鐘後再進行壓片,或作其他時間的調整。
注意事項:
1.轉漬膜在接上一級抗體後須保持濕潤,不能乾掉。
2.請在壓片前再配製化學發光試劑,配製量足夠覆蓋轉漬膜即可,勿將使用過混合試劑重複或混合使用。
3.請使用乾淨微量吸管(Tip)並單一取用每種試劑,勿重複多次試用避免污染。
4.除了取用底片、壓片曝光及洗片處理外,其他步驟可不必在暗室中操作。
5.壓片後轉漬膜可經由T-Pro Western Blot Stripping Reagent (JB11-K002) 洗去原有抗體後,重複再次使用。
業務專員 許 虹宜 0920312382
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Calcein AM為非螢光染劑,Calcein(鈣黃綠素)的基礎上加強了疏水性,因此能夠輕易穿透活細胞膜。當其進入細胞質後,被細胞中的酯酶水解為Calcein,並發出強綠色螢光物質。Calcein AM細胞毒性低,因此為為細胞螢光染色最佳選擇。Calcein AM不會抑制任何的細胞功能如增殖或淋巴球的趨化性,與標準的51Cr-釋放法所得結果相一致的。 Calcein AM可應用於活細胞觀察及cell proliferation分析、活細胞和死細胞的雙重染色、Endothelial cell migration、Endothelial cell tubulogenesis、Tumor cell invasion 細胞侵入試驗。太鼎生物科技 發表在 痞客邦 留言(0) 人氣(140)
美國SBA(Southern Biotechnology Associates, Inc.)公司建於1982年,由美國伯明罕的阿拉巴馬大學(UAB)的Dr. Max Cooper細胞免疫學實驗室的科學家創建。SBA致力於高品質、高親和純化的二抗的生產、純化和標記。同時,SBA還提供各種親和純化的多克隆和單克隆抗體,其中包括:螢光素和酶標記物,低內毒素/不含疊氮化物(LE/AF)製劑,F(ab)和F(ab')2,此外還有純化的免疫球蛋白和膠原質。原廠連結: www.southernbiotech.com更多參考內容: WWW.BIOPIONEER.COM.TW太鼎生物科技 發表在 痞客邦 留言(0) 人氣(32)

美國TREVIGEN公司成立於1992年,致力於研發偵測細胞凋零、DNA的斷損與修復、體內血管新生分析套組(In vivo angiogenesis assay, DIVAA)、體外血管新生分析套組(in vitro angiogenesis assay)、慧星分析法(Comet assay Kit)、細胞移行/細胞侵入 (Cell migrasion and Cell invasion assay)、基底膜萃取物 Basement Membrane Extract, 以及PAR、PARP、PARG所需用到的抗體與試劑。
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T-Pro Prestained Protein Ladder是一種擁有三種不同顏色及十種不同分子量之蛋白質標識,其所能標示之分子量範圍從10到180 kDa,其中含有75 kDa的紅色條紋標識及25 kDa的綠色條紋標識。本產品乃是專門設計用於監測蛋白質電泳中蛋白質分離之過程及評估進行西方點墨法後,蛋白質轉移至轉漬膜 (PVDF, nylon, or nitrocellulose)之效率和對所偵測蛋白質之分子量做最後評估時所用。本產品使用時相當方便,無須任何處理及加熱步驟即可立即使用。太鼎生物科技 發表在 痞客邦 留言(0) 人氣(433)
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還在使用一抗+二抗來做flow的分析嗎? 提供您一個 “專一性高及方便” 的分析方法!! 專利研發Lightning-Link產品, 直接在一抗上做標誌 (可標誌螢光蛋白 螢光dye HRP Biotin等) 只要一個步驟 回收100% 這個方法克服二抗所造成的背景值過高及Host來源不同所造成Crosstalk的現象.
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Lightning-link 抗體標誌介紹: 太鼎生物科技 發表在 痞客邦 留言(0) 人氣(25)
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