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LB Agar (Miller配方)培養基 | 貨號NCM0142A

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LB培養基Lysogeny broth,LB)廣泛解釋爲Luria-Bertani培養基,依據其發明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani) 的說法,這個名字來源於英語的 Lysogeny broth,即溶菌培養基。Luria-Bertani培養基是微生物學實驗中最常用的營養性培養基,用於培養大腸桿菌(E. coli i) 等細菌,Broth加入瓊脂(Agar)製成的固態培養基。加入抗生素的 LB 培養基(LB Broth) 可用於篩選大腸桿菌爲宿主的cloning。

原理與知識.jpg

 

LB Agar(Miller)是一種營養豐富的培養基,設計用於培養重組菌(recombinant strains) 的純培養物,它基於Miller描述的配方。大腸桿菌在LB培養基中生長至對數晚期 (late log phase)。 一些plasmid vectors複製到high copy number並且不需要選擇性擴增。 一些載體不能如此自由地複制並且需要被選擇性地擴增。 可加入氯黴素(Chloramphenicol)以抑制宿主合成(host synthesis)並防止細菌染色體(bacterial chromosome)的複製。LB Agar,Miller含有10 g / L的氯化鈉,與Lennox配方中的含量不同。 這允許研究人員為特定菌株選擇最佳鹽濃度。 培養基可以無菌補充葡萄糖glucose或抗生素antibiotics。註明: Product was previously known as Acumedia Product: 7213 LB Agar (Miller); and LabM Product: LAB168 LB Agar (Miller)。氯化鈉的量經常隨細菌的生長需求不同而有所改變LB-Miller (10 g/L NaCl)、LB-Lennox (5 g/L NaCl)、LB-Luria (0.5 g/L NaCl)。

 

胰蛋白腖 (Tryptone )------------------------------------- 10.0 g / L

酵母抽提物(Yeast Extract ) ----------5.0g / L

Sodium Chloride ------------------------10.0g / L

Agar-----------------------------15.0 g/L

 

Preparation培養基使用方法: 將40克培養基溶於1升純淨水中。如有必要,經常攪拌加熱以完全溶解Medium。在121℃下高壓滅菌15分鐘。等冷去後,最終7.0 ± 0.2 at 25°C, 25℃分裝於Petri dish培養皿中。

檢驗方法:檢體經系列稀釋後,以平板計數培養基培養及計數之方法。 2.1. 工作環境:工作平台須寬敞、潔淨、光線良好,操作平台光度為 100 呎燭光以上,密閉室內換氣良好,儘可能沒有灰塵及流 動空氣。每 15 分鐘落菌數不得超過 15 CFU/培養皿。

培養基.jpg

 

 

Product # Product Description
NCM0142A LB Agar (Miller), 500 g
NCM0142B LB Agar (Miller), 5 kg
NCM0142C LB Agar (Miller), 10 kg
NCM0142D LB Agar (Miller), 25 kg (European only size)
NCM0142E LB Agar (Miller), 50 kg (US only size)

 

 

更多資料來自FDA生菌數之檢驗 (參考方法)

文獻References

  1. European Pharmacopoeia 9th Edition (2017) 2. United States Pharmacopeia National Formulary 2017: USP 40 NF 35 3. Japanese Pharmacopeia 17th Edition (2017) 4. Sabouraud, R. 1892. Ann. Dermatol. Syphilol. 3:1061. 5. Jarett, L., and A. C. Sonnenwirth (eds.). 1980. Gradwohl’s and parasitic infections, 7th ed. American Public Health Association, Washington, D.C.

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