細胞凋亡系列商品- Annexin V-FITC Apoptosis Kit | 貨號abcam ab14085
細胞凋亡是指為維持有機體內環境穩定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡。正常情況下，任何細胞在形成過程中發生的異常都會通過凋亡消除。例如，體內的癌細胞增長為腫瘤的過程會受細胞凋亡的引導而被抑制。然而，在抑癌基因p53出現問題時，凋亡就不會誘導發生，從而導致癌細胞的不斷增長。細胞凋亡可以通過細胞形態的變化或生物化學的變化來檢測。目前常用的指標有caspase活性分析、DNA片段分析、及磷脂醯絲氨酸phosphatidylserine (PS)的外翻等實驗。
Ab14085 用於確定小鼠皮質集合管細胞 (mCCD) 中的次要水平的細胞凋亡（使用 Annexin V-FITC 和 PI）。mCCD 細胞與無血清培養基一起孵育 48 小時。質膜上的綠色標籤 (Annexin V-FITC) 和核紅 (PI) 染色的缺失表明細胞凋亡而非壞死。熒光顯微鏡用於分析細胞。
Annexin V 細胞凋亡偵測原理
Annexin V細胞染色，用於檢測細胞凋亡早期的細胞膜變化。在細胞凋亡早期，膜磷脂醯絲氨酸phosphatidylserine (PS)由脂膜內側翻向外側。Annexin V是一種Ca離子依賴性磷脂結合蛋白，可以與磷脂醯絲氨酸phosphatidylserine (PS) 特異結合。用綠色螢光FITC標記的Annexin V通過流式細胞儀或螢光顯微鏡可以檢測到細胞凋亡的發生。結合細胞核染劑PI，利用流式細胞儀或螢光顯微鏡可偵測偵測細胞凋亡現象及其凋亡分期。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種核酸染料，PI只能透過凋亡晚期和死細胞的細胞膜，因此Annexin V和PI結合使用，可以區分凋亡早晚期的細胞及死細胞。
產品介紹:
Annexin V-FITC Apoptosis Kit提供一個步驟、快速分析細胞早期凋亡現象。套組內包括有Annexin V-FITC及Propidium Iodide 。PI雙染劑；綠色螢光FITC標記的Annexin V通過流式細胞儀或螢光顯微鏡可以檢測到細胞凋亡的發生。結合細胞核染劑PI，利用流式細胞儀或螢光顯微鏡可偵測偵測細胞凋亡現象及其凋亡分期。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種核酸染料，PI只能透過凋亡晚期和死細胞的細胞膜，因此Annexin V和PI結合使用，可以區分凋亡早晚期的細胞及死細胞。Biovision提供FITC、Cy3、EGFP、Cy5、PE、Biotin等多種Annexin V標誌試劑/套組，在實驗選擇上具較多選擇。另具有25、100、400個分析包裝套組。
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HeLa 細胞通過胰蛋白酶消化與漂浮的非活細胞一起收穫。細胞用 PBS 洗滌並在分析前 20 分鐘懸浮在檸檬酸鈉緩衝液中。HeLa 細胞用米托蒽醌 (MX) 和 MX + 伊馬替尼處理 48 小時。然後用膜聯蛋白 V-FITC 細胞凋亡染色/檢測試劑盒 (ab14085) 對樣品進行染色。FACSCalibur 流式細胞儀用於細胞週期分析。
PC3 細胞以 10 6 個細胞/ml 接種並孵育過夜，然後用不同濃度的 CTA095 處理 24 小時。然後使用 Annexin-V FITC 細胞凋亡檢測試劑盒 (ab14085) 分析細胞凋亡。
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