高效能Competent cell勝任細胞





具備有高效能的Competent cell勝任細胞,是cloning技術基本要領。專利技術讓Competent cell揚名全世界。其高效能的能力,讓cloning更容易,在一分鐘就做完Transformation。依據其應用及菌種細分如下。





NEW!! 超高效能DH5a勝任細胞 –cloning    


 


Competent
cell
勝任細胞 (strain: DH5a)效能>1X10-10 CFU/ug


全世界最常見也是最普遍的strain,
其適用於
大片段的plasmid
DNA Cloning
,其plasmid DNA片段可大於10~40Kb





訂貨編號: (可進行80Cloning) 效能>1X10-10 CFU/ug


產品規格: 100ul/vial, 80vials,


產品附贈: control plasmid 5ul
(10-4ug/ul) pUC19




快速JM109----勝任細胞





Competent cell勝任細胞 (strain: JM109)




配合TA cloing kit, 或是快速ligation kit, 6分鐘完成transformation




cloning變得更容易





HOT!! DH5a----常用型勝任細胞---cloning    


 


Competent
cell
勝任細胞 (strain: DH5a)效能>1X10-8 CFU/ug


全世界最常見也是最普遍的strain,
其適用於大片段的plasmid DNA Cloning,其plasmid DNA片段可大於10~40Kb





訂貨編號 (可進行80Cloning)


產品規格: 100ul/vial, 80vials,


產品附贈: control plasmid 5ul
(10-4ug/ul) pUC19





蛋白質表現BL21----勝任細胞


 


C ompetent cell勝任細胞 (strain: BL21) ; 效能>2X10-7 CFU/ug





BL21適用於生產大量的Protein蛋白質表現BL21,這個菌株主要是帶有一個lac promoter,在promoter之後則有T7 RNA polymerase的基因,整個白質表達還需要質體上帶有T7
promoter
,使用時加入IPTG用以啟動lacpromoter使T7 RNA polymerase產生,之後就可以啟動質體上的T7 promoter。這個菌株對於protein表達比較好的原因在於,因為一般的菌表達過量的蛋白質之後,形成stress,甚至protein本身對菌株就有毒性,這些原因會造成protein產量下降,可是使用DE3系統,可以控制在最佳生長狀況下,進行誘導protein產生,以提高protein的產量與效率,最高可以得到在總蛋白質中,具有50%的產量。





訂貨編號:  (可進行40Cloning)


產品規格: 100ul/vial, 40vials,


產品附贈: control plasmid 5ul
(10-4ug/ul) pUC19





Competent
cell
勝任細胞注意事項】





1.本建議濃度以新鮮配製之抗生素為準。


2.使用過期之抗生素,將因藥性不足,易產生假性轉形菌落。


3.若使用過量的抗生素濃度或同時使用多種抗生素進行篩選,轉形效率會明顯下降。請務必依建議濃度進行抗生素篩選





【轉形之正對照組操作步驟】





每組皆附5 μl
10-4 μg/μl pUC19
作為正對照組之轉形質體。


請將pUC19質體濃度稀釋為10-6-10-7μg/μl,取1 μl 10-6-10-7μg/μl pUC19


進行之轉形,並以含20
μg/ml Ampicillin
LB培養基進行篩選。





【轉形效率之計算】





轉形效率指每1 μg質體DNA經由轉形後,勝任細胞形成的菌落數。例:


10-6 μg pUC19經由轉形後,勝任細胞形成的100個菌落,則轉形效率為100/10-6 =1x108 (cfu/μg)





【藍/白篩選】


 


進行轉形前,請先確認質體帶有LacZ operon。轉形後,請將勝任細胞塗佈於含0.5 mM IPTG 40~60 μg/ml X-galLB培養基。37oC培養後,白色菌落表示外源DNA嵌入LacZ operon,藍色菌落則仍具備正常的β-galactosidase代謝能力。





【含抗生素之LB培養基配方】





10 g/L Tryptone 5 g/L Yeast extract 10 g/L NaCl 15 g/L
Agar
NaOH調整酸鹼值至pH7.5



高溫高壓滅菌後,待降溫至55oC




加入適當濃度之抗生素(見背面說明)





cloning 相關產品:
cloning plating beads
100g


 


【供應廠商】太鼎生物科技有限公司



【連絡人】許虹宜 0920-312382



【台北公司】02-86609496 【台中公司】0935-229803



【相關網址】 www.biopioneer.com.tw



 




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