Transfection Reagent (in vivo)


 



說明:
T-Pro G – Fect (體內)轉殖試劑是帶有陽離子的無菌溶液,因其帶正電可與DNA形成穩定的複合物。在生物體內進行基因轉殖的過程中,此複合物的型態可保護DNA不受降解,同時使轉殖的過程更容易。傳送DNA的過程可通過各種途徑,包括靜脈注射,腹腔,腫瘤內注射等,而試劑在這樣的使用過程中並未檢測到發炎反應的產生。


 


試劑提供:
Reagent A或使用無菌 5W/ V葡萄糖溶液代替做為稀釋的DNA之用。



一般注意事項:
DNA的品質要求
 DNA
的品質是轉殖是否成功的重要關鍵。建議
A260/A280比值1.8或者更高。同時DNA應該是無菌的,且不具任何污染物,如內毒素。


選擇啟動子(promoter)
 在標的組織 /器官中,高目標基因表現量取決於啟動子與目標基因的選用。巨細胞病毒(CMV)啟動子是最常使用於各類細胞中。但有些研究也常使用LTRSV40)或(RSV)作為啟動子(promoter)





轉殖試劑 / DNA比率:
轉殖試劑的使用量取決於DNA的量,轉殖基因使用量和被轉殖動物的比率可先參照(1)。再依據結果加以調整取得最佳效果。


 
DNA注射建議量:
DNA注射量,取決於所使用實驗動物的種類和注射方式(見表 1),以及標的組織或器官。
為了避免T-Pro G - Fectin vivo/ DNA複合物沉澱,建議注射DNA的最終濃度不應超過0.5μg/μl
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