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T-Pro LumiFast Chemiluminescence Detection Kit & T-Pro LumiFast Plus Chemiluminescence Detection Kit  為一方便用於偵測直接或間接帶有HRP的Western blotting，Southern 或 Northern化學發光之試劑套組。在有過氧化氫存在的情形下，Horseradish peroxidase (HRP)會催化環狀二?基??(cyclic diacylhydrazides)的氧化，像是發光胺(luminol)。氧化當下，發光胺(luminol)的中間產物處於激發態，此產物藉由發光的方式衰退為基態。強化劑可增強發光的能量。利用此方法可以藉由直接或間接標定有HRP的抗體/鏈親和素(streptavidin)進而偵測特殊抗原或是核酸序列。

操作流程：

1.將T-Pro LumiFast Chemiluminescence Detection Kit & T-Pro LumiFast Plus Chemiluminescence Detection Kit 中的試劑A及試劑B等體積混合至足夠蓋過membrane的使用量(平均用量最少為0.1ml/cm2)。於室溫使此混合試劑均勻混合作用1-2分鐘。

2.將membrane上過量的緩衝液倒掉，但要保持轉漬膜的濕潤。加入步驟1混合好的試劑於轉漬膜上，在室溫下作用1-2分鐘。

3.將步驟2過多的混合試劑倒掉，且將轉漬膜置於兩層保鮮膜中間或用兩片透明塑膠片密封，注意不可以有氣泡，並將轉漬膜吸附蛋白正面朝上，同時轉漬膜請勿過濕。

4.將步驟3轉漬膜置入底片夾中。置入底片，要避光或是使用紅光。曝光約30至90秒。

5.置入新的底片前，請先將原先片夾中的底片取出，並將底片放入顯影劑中。

6.第二張底片的曝光時間可依據第一張的時間做調整。

7.如果訊號過強，可在加入呈色劑15~30分鐘後再進行壓片，或作其他時間的調整。

注意事項：

1.轉漬膜在接上一級抗體後須保持濕潤，不能乾掉。

2.請在壓片前再配製化學發光試劑，配製量足夠覆蓋轉漬膜即可，勿將使用過混合試劑重複或混合使用。

3.請使用乾淨微量吸管(Tip)並單一取用每種試劑，勿重複多次試用避免污染。

4.除了取用底片、壓片曝光及洗片處理外，其他步驟可不必在暗室中操作。

5.壓片後轉漬膜可經由T-Pro Western Blot Stripping Reagent  (JB11-K002) 洗去原有抗體後，重複再次使用。