西方轉漬分析-ECL【市售ECL主要市場比較】

太鼎生物科技有限公司 (02)86609496



業務專員 許 虹宜 0920312382



www.biopioneer.com.tw




 


 


1. PerkinElmer


市面上大部份ECL的等級是nanogram,PerkinElmer Lightning plus靈敏度為1-10 picogram,包裝規格如下: 170mlx4 特價~7000元  (~10元/ml)


Western Blot Chemiluminescence Reagent Plus



(~10/ml)



 




















目錄號碼

包裝

可使用面積

NEL104

2 x 170 ml

2,500 cm2 membrane

NEL105

4 x170 ml

5,000 cm2 membrane



2. Pierce


SuperSignal West Pico Chemiluminescent Substrate 


靈敏度為picogram 250mlx2   特價~7000元  (~14元/ml) 第二件半價 (~10元/ml)SuperSignal West Pico Chemiluminescent Substrate 


(~10~14/ml)



 


T-PRO新一代高靈敏度冷光試劑ECL


 



() fetagram ECL,靈敏度接近fg (靈敏度接近millipore ECL)


200mlx2 特價3500元


() Picogram ECL,靈敏度接近pg (靈敏度高於Pierce ECL, PerkinElmer )



200mlx2 特價2500元



 



(~6.25/ml)-->picogram等級


 




 

 



【太鼎生物科技有限公司02-86609496


 



(~8.75/ml)-->fetogram等級



 


T-Pro LumiFast Chemiluminescence Detection Kit, 貨號#JT96-K001S


400ml特價2500


T-Pro LumiFast Plus Chemiluminescence Detection Kit, 貨號#JT96-K002S  400ml特價3500



 



冷光試劑介紹:


T-Pro LumiFast Chemiluminescence Detection Kit & T-Pro LumiFast Plus Chemiluminescence Detection Kit  為一方便用於偵測直接或間接帶有HRPWestern blottingSouthern Northern化學發光之試劑套組。在有過氧化氫存在的情形下,Horseradish peroxidase (HRP)會催化環狀二酰基酰肼(cyclic diacylhydrazides)的氧化,像是發光胺(luminol)。氧化當下,發光胺(luminol)的中間產物處於激發態,此產物藉由發光的方式衰退為基態。強化劑可增強發光的能量。利用此方法可以藉由直接或間接標定有HRP的抗體/鏈親和素(streptavidin)進而偵測特殊抗原或是核酸序列。


操作流程:


1.      T-Pro LumiFast Chemiluminescence Detection Kit & T-Pro LumiFast Plus Chemiluminescence Detection Kit 中的試劑A及試劑B等體積混合至足夠蓋過membrane的使用量(平均用量最少為0.1ml/cm2)。於室溫使此混合試劑均勻混合作用1-2分鐘。


2.      membrane上過量的緩衝液倒掉,但要保持轉漬膜的濕潤。加入步驟1混合好的試劑於轉漬膜上,在室溫下作用1-2分鐘。


3.      將步驟2過多的混合試劑倒掉,且將轉漬膜置於兩層保鮮膜中間或用兩片透明塑膠片密封,注意不可以有氣泡,並將轉漬膜吸附蛋白正面朝上,同時轉漬膜請勿過濕。


4.      將步驟3轉漬膜置入底片夾中。置入底片,要避光或是使用紅光。曝光約3090秒。


5.      置入新的底片前,請先將原先片夾中的底片取出,並將底片放入顯影劑中。


6.      第二張底片的曝光時間可依據第一張的時間做調整。


7.      如果訊號過強,可在加入呈色劑15~30分鐘後再進行壓片,或作其他時間的調整。


注意事項:


1.      轉漬膜在接上一級抗體後須保持濕潤,不能乾掉。


2.      請在壓片前再配製化學發光試劑,配製量足夠覆蓋轉漬膜即可,勿將使用過混合試劑重複或混合使用。


3.      請使用乾淨微量吸管(Tip)並單一取用每種試劑,勿重複多次試用避免污染。


4.      除了取用底片、壓片曝光及洗片處理外,其他步驟可不必在暗室中操作。


5.      壓片後轉漬膜可經由T-Pro Western Blot Stripping Reagent  (JB11-K002) 洗去原有抗體後,重複再次使用。

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