7-Aminoactinomycin D (7-AAD) DNA活性染劑
美國SouthernBiotech公司
貨號: 10042-01
品名: 7-Aminoantinomycin D (7-AAD)
規格: 100 tests
7-AAD (7-amino-actinomycin D)是一種活性核酸染料,它不能通過正常細胞質,隨著細胞凋亡、細胞死亡過程,細胞質對7-AAD的通透性逐漸增加,進而結合細胞凋亡中的DNA,在合適波長激發光的激發下可發出明亮的紅色螢光。經由7-AAD標記DNA的強弱,可將細胞分為三種:7-AAD染劑表現強螢光時,代表為死亡細胞,7-AAD弱是凋亡細胞,7-AAD-為正常活力細胞。7-AAD與PI 一樣有著相似的螢光特性,但其發射波譜較PI窄,對其他檢測通道的幹擾更小,在多色螢光分析中是PI 的最佳替代品,可與Annexin V-EGFP/FITC/PE聯合使用。
7-AAD適用於培養的細胞染色,可應用於螢光顯微鏡、鐳射共聚焦儀器或流式細胞儀檢測。
螢光顯微鏡觀察
1. 滴一滴上述染色後的細胞懸液於載玻片上,並用蓋玻片蓋上細胞;
2.對於貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞並誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,並設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3. 將蓋玻片倒置於載玻片上,於螢光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD螢光信號呈紅色。
Flow cytometry analysis of viable cells. Product can be used in conjunction with R-PE (R-phycoerythrin) and FITC (fluorescein) antibodies in 2-color analysis due to minimal emissions overlap. Product can also be used as a vital dye with the following SouthernBiotech Annexin V conjugates:
10040-09 Annexin V-R-PE
10040-11 Annexin V-APC
10040-15 Annexin V-CY?5
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